产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆及结构分析

应用PCR技术,从产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中,扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素基因C端片段(cpa408),并将其克隆至pMDl8-T载体中．经转化,α互补蓝白菌落选择培养,提取质粒,进行PCR和Eco RⅠ、PstⅠ双酶切鉴定,筛选出阳性重组克隆．经核苷酸序列分析证实,cpa408基因阅读开放框架由372个核苷酸组成,编码124个氨基酸．经计算机分析,cpa408基因序列与国外文献报道的A型产气荚膜梭菌α毒素基因C端片段同源性达99％以上,表明所克隆的基因即为α毒素基因C端片段．     

A型产气荚膜梭菌α毒素全基因的分子克隆与核苷酸序列分析

应用PCR技术,从A型产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素全基因(cpa 1229基因)并将其克隆至pMDl8-T载体中。经转化、IPTG／X—gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRI／Pstl双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆。经核苷酸序列分析证实,cpa1229基因阅读开放框架由1194bp组成。经GenBank检索对照分析,cap1229基因序列与国外献报道同源性达98．3％,表明本实验所克隆的cpa1229基因即为A型产气荚膜梭菌α毒素基因。     

稻瘟病抗病基因Pi15的精细定位

稻瘟病抗病基因Pi15曾被作者鉴定为与已知抗病基因Pii具有连锁关系,但是,Pii基因究竟位于染色体6还是9上存在争议。为了确定Pi15基因的染色体位置,利用分子标记在由15个抗病个体和141个感病个体组成的F_2群体中,通过混合群体分离法(BSA)与隐性群体分析法(RCA)相结合的手段,对目标基因进行了连锁分析。首先,从染色体6和9分别选择10个微卫星标记进行了分析,结果表明,只有位于染色体9的RM316与目标基因连锁,重组率为(19.1±3.7)％。为了进一步确定这种连锁关系,从染色体9选择了4个序列标定位点(STS)标记进行分析,结果表明,只有G103与目标基因连锁,重组率为(5.7±2.1)％。为了获得与目标基因更加紧密连锁的分子标记,对目标基囚进行了RAPD分析。在筛选、分析了1000个随机引物之后,从中获得了3个目标基因紧密连锁的分子标记BAPi15_(486)、BAPi15_(782)、BAPi15_(844)。它们与目标基因的重组率分别为0.35％、0.35％和1.1％。这些紧密连锁的分子标记可作为分子标记辅助基因聚合和克隆的出发点。     

老年肺炎患者血清Apelin-13水平与疾病严重程度和预后的相关性研究

摘要 目的：探讨与研究老年肺炎患者血清Apelin-13水平与疾病严重程度和预后的相关性。方法：采用回顾性研究方法,2018年3月到2021年2月选择在延安大学咸阳医院住院诊治的老年肺炎患者78例作为研究对象,检测血清Apelin-13水平,使用急性生理学及慢性健康状况评分系统（APACHEⅡ）、CT严重程度指数（CTSI）、序贯性器官功能衰竭评分（SOFA）评定患者的疾病严重程度,随访患者的预后并进行相关性分析。结果：所有患者随访到2021年7月1日,平均随访时间为18.47±2.82个月,死亡18例（死亡组）,占比23.1 %。死亡组的性别、年龄、生活行为、体重指数、病程、合并疾病等与非死亡组对比无差异（P>0.05）,但血清Apelin-13表达水平具有差异,且死亡组较非死亡组低（P<0.05）。死亡组的APACHEⅡ评分、SOFA评分、CTSI评分高于非死亡组（P<0.05）。在78例患者中,Pearson分析显示血清Apelin-13水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分、CTSI评分存在负相关性（P<0.05）。多因素logistic回归分析显示：血清Apelin-13水平（OR=3.770）、APACHEⅡ评分（OR=3.624）、SOFA评分（OR=2.422）、CTSI评分（OR=1.842）都为影响患者预后死亡的重要因素（P<0.05）。结论：老年肺炎患者血清Apelin-13水平呈现低表达状况,与患者的APACHEⅡ评分、SOFA评分、CTSI评分等疾病严重程度指标存在相关性,也是影响患者预后死亡的重要因素。     

抑郁情绪、生活习惯与老年高血压患者雌激素受体α表达水平的相关性分析

摘要 目的：探讨抑郁情绪、生活习惯与老年高血压患者雌激素受体α（ER-α）表达水平的相关性。方法：选取我院2019年1月到2020年1月收治的82例老年高血压患者作为研究对象,将其分为观察组,另选取同期来我院体检的82名健康者,将其分为对照组,检测相关指标并进行相关性分析。结果：两组受检者BMI、空腹血糖、吸烟、饮酒、体育锻炼、喜食油腻食物、喜食咸菜或口味较重情况、HAMD评分、SDS评分以及ERα mRNA表达水平对比差异显著（P＜0.05）;logistic回归分析表明：BMI、吸烟、饮酒、体育锻炼、喜食咸菜或口味较重、SDS评分以及ER?琢mRNA表达水平为高血压独立危险因素（P＜0.05）;不同吸烟、饮酒水平、喜食咸菜或口味较重情况以及SDS评分水平的患者ER?琢mRNA表达水平对比差异显著（P＜0.05）;Spearman相关分析结果显示：吸烟、饮酒、喜食咸菜或口味较重与ER-?琢呈负相关（P＜0.05）,SDS评分与ER-α呈正相关（P＜0.05）。结论：BMI、吸烟、饮酒、体育锻炼、喜食咸菜或口味较重、SDS评分以及ERαmRNA表达水平是高血压发生的独立危险因素,其中抑郁情绪和吸烟、饮酒、喜食咸菜或口味较重等生活习惯与ER-α表达水平明显相关,因此对于ER-α表达水平明显降低的患者要通过相关措施改善患者生活习惯,控制抑郁情绪,提升患者血压控制水平。     

鹿内阿米巴新种的研究

在一只毛冠鹿(Elaphoduscephalophus)粪便内,检获一种小型单核包囊型阿米巴。经铁苏木素染色,显微测微观察,其滋养体大小为6.00—11.00μm,平均为8.20±1.48μm;包囊大小为5.50—8.00μm,平均为6.95±0.06μm;属内阿米巴科Endamoebidae内阿米巴属Entamoeba的一新种,命名为鹿内阿米巴(Entamoebacervumsp.nov.)。     

恙虫病立克次氏体引起宿主细胞的组织化学改变

本文叙述应用RNA及DNA染色方法,观察恙虫病立克次氏体感染兔睾丸单层细胞后的核酸染色改变。随着感染后日数的增加,在胞浆内细胞核旁可见有规律地出现堆状排列的鲜红色RNA小颗粒,这些颗粒与恙虫病立克次氏体的排列位置一致,出现时间亦与立克次氏体的繁殖曲线平行;同时感染后的细胞浆RNA染色往往也较对照深。此外,感染后的_细胞核及核仁有时亦可见到一些不规律的改变。     

燕山-太行山区黑带食蚜蝇(双翅目:食蚜蝇科)谱系地理学分析

为了解燕山-太行山区黑带食蚜蝇不同地理种群的遗传分化及其谱系地理格局,对河北、内蒙古、山西、河南等地样本的线粒体DNA-COI基因片段进行扩增和测序,成功得到36条黑带食蚜蝇COI基因序列,其片段长度为658 bp,平均A+T含量(69.9%)明显高于C+G含量(30.1%),没有插入和缺失现象。对这些COI基因序列进行分析,结果显示,雾灵山种群具有较高的种群遗传多样性。AMOVA分析表明,黑带食蚜蝇遗传分化主要来自种群内部。Mantel检验结果显示,各种群的遗传距离和地理距离之间相关性不显著(P=0.639),不符合地理隔离模型的推断。使用最大似然法构建系统发育树,结果表明:河北承德雾灵山种群中的单倍型Hap3独立为一支;对各种群的分歧时间进行估计,发现其分歧时间大约在0.02~0.94 Ma,处于更新世,部分种群间未发生分化。据此推测,燕山-太行山区黑带食蚜蝇的分化可能是由第四纪冰期气候的反复变化导致的,且雾灵山应为该地区黑带食蚜蝇在第四纪最后一次冰期的重要避难所之一。     

不同供氮量对二月兰产量、土壤无机氮残留及氮平衡的影响

研究华北冬绿肥二月兰对不同供氮水平的响应特征,确定实现绿肥高产高效的土壤适宜供氮量,可为华北集约化农田最大化发挥绿肥生态效应和优化春玉米/冬绿肥轮作体系氮素管理提供理论依据和技术参考.选取多年不施肥试验地设置供氮梯度试验,研究了不同供氮水平对冬绿肥二月兰翻压前地上部生物量累积、氮素吸收、土壤无机氮残留和冬绿肥季土壤氮素平衡的影响.结果表明: 在土壤无机氮含量较低(0～90 cm土层15 kg·hm^-2)条件下,施氮显著提高二月兰生物量和吸氮量.其中,施氮90 kg·hm^-2处理表现最高,绿肥生物量(干质量)和吸氮量分别为2031.0和42.0 kg·hm^-2;土壤无机氮残留量随施氮量增加而增加,且在施氮量高于60 kg·hm^-2后呈现快速增加趋势;随施氮量增加二月兰生长季的表观氮平衡表现出由亏缺到盈余的变化特征,在施氮量为60～90 kg·hm^-2条件下氮收支基本平衡.土壤供氮量(绿肥播前0～90 cm土壤无机氮含量与施氮量之和)与二月兰生物量、吸氮量和绿肥翻压前土壤无机氮含量的关系可以分别用二次、线性加平台和指数方程进行模拟,依据模型计算二月兰生物量最高值(2010 kg·hm^-2)时的播前土壤供氮量和绿肥翻压前土壤无机氮残留量分别是136和78 kg·hm^-2;而在二月兰吸氮量最高值40 kg·hm^-2时,二月兰生物量为1919 kg·hm^-2,相当于最高生物量的95%,绿肥翻压前土壤残留无机氮降低至57 kg·hm^-2,与之对应的播前土壤供氮量为105 kg·hm^-2,该值与目前华北地区优化施氮下玉米收获后土壤残留无机氮推荐含量(100 kg·hm^-2)基本相当.综合考虑绿肥的农学和环境效应,春玉米/冬绿肥轮作体系中二月兰播前土壤供氮量应控制在100～105 kg·hm^-2.